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動物疫病血凝分析儀

更新時間:2018-05-25      點擊次數:2097

動物疫病血凝分析儀型號:DY-7000



試驗方法: 
1 血凝(HA)試驗 
1) 在V型微量反應板的1~12孔均孔加入0.025ml PBS,換滴頭。 
2) 吸取0.025ml血凝抗原加入*孔,混勻。 
3) 從第1孔吸取0.025ml血凝抗原加入第2孔,混勻后吸取0.025ml加入第3孔,如此進行對倍稀釋至第11孔,從第11孔吸取0.025ml棄去,換滴頭。 
4) 每孔再加0.025ml PBS。 
5) 每孔均加入0.025ml 1%(V/V)雞紅細胞懸液(將雞紅細胞懸液充分搖勻后加入)。 
6) 將反應板在振蕩器上震蕩1~2分鐘或輕扣反應板混合反應物,在室溫(20~25℃)下靜置40分鐘后觀察結果,(如果環境溫度太高,可置4℃環境下),在對照孔紅細胞顯著呈鈕扣狀時判定結果。 
7) 結果判定  將板傾斜,觀察紅細胞有無呈淚滴狀流淌。*血凝(不流淌)的抗原或病毒zui高稀釋倍數代表一個血凝單位(HAU)。 
2  血凝抑制(HI)試驗 
1) 根據HA試驗測定的效價,計算配制4個血凝單位(4HAU)抗原。以*血凝的病毒zui高稀釋倍數作為終點,終點稀釋倍數除以4即為含4HAU抗原的稀釋倍數。例如,HA效價為1:256,則4HAU抗原的稀釋倍數應是1:64(256除以4)。 
2) 加稀釋液: 
在微量反應板的第1~11孔加入0.025ml PBS,第12孔加入0.05ml PBS。 
3) 稀釋待檢血清: 
取1號待檢血清0.025ml加入*排第1孔,充分混勻后吸0.025ml于第2孔,依次對倍稀釋至第10孔,從第10孔吸取0.025ml棄去。 
取2號待檢血清加入第2排;取3號待檢血清加入第3排……均按上法稀釋。 
  注意!每取一份血清時,必須更換吸頭。 
4) 稀釋陰性血清: 
  在血凝板的第7排*孔加陰性血清0.025ml,對倍稀釋至第3孔,混勻后從該孔取出0.025ml棄去。 
    5) 稀釋陽性血清: 
  在血凝板的第8排第1孔加陽性血清0.025ml,對倍稀釋至第10孔,混勻后從該孔取出0.025ml棄去。 
6) 第1~11孔均加入含4HAU混勻的病毒抗原液0.025ml,在室溫(20~25℃)下靜置30分鐘或2~8℃ 50分鐘。 
7) 每孔加入0.025ml 1%(V/V)的雞紅細胞懸液,震蕩混勻,在室溫(20~25℃)下靜置20~30分鐘或2~8℃ 45~60分鐘,對照紅細胞將呈明顯鈕扣狀沉于孔底。 
結果判定  
以*抑制4 HAU抗原的zui高血清稀釋倍數判為該血清的HI效價。 
只有陰性對照孔血清滴度不大于2log2,陽性對照血清誤差不過1個滴度,試驗結果才有效。 
禽流感滅活疫苗的免疫效果判定:家禽免疫后21天進行免疫效果監測。禽流感抗體血凝抑制(HI)抗體效價≥24判定為合格 
存欄家禽抗體合格率達到≥70%判定為合格。 
新城疫免疫效果監測:免疫21天后,進行免疫效果監測。抗體血凝抑制試驗抗體效價≥25判定為合格 
存欄家禽抗體合格率達到≥70%判定為合格。 


 

 

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